免疫荧光

Brdu染色

服务介绍:

可代替胸腺嘧啶在DNA合成期(S期),渗入正在复制的DNA分子,活体注射或细胞培养加入,而后利用抗Brdu单克隆抗体,ICC染色,显示增殖细胞。同时结合其它细胞标记物,双重染色。


实验结果展示:

小鼠脑-Brdu


实验流程:

1.加破膜液破膜20min;

2.DAPI染核8min;

3.用4%的多聚甲醛固定10min;

4.用纯水稀释盐酸(盐酸:纯水=1:7),滴加到爬片上37℃孵育40min;

5.用4%的多聚甲醛固定10min;

6.加3%BSA封闭,孵一抗4℃过夜,PBS冲洗3次;

7.孵二抗50min, PBS冲洗3次;

8.滴加一滴抗荧光淬灭封片剂封片,显微镜观察

备注:组织样本的BRDU染色,可以按照常规的免疫荧光流程进行操作,不需要用盐酸处理。 细胞样本的BRDU染色,则需要严格按照以上的步骤进行。


送样运输要求:

1.组织样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上,常温运输送样。

2.石蜡切片常温保存运输

3.冰冻切片-20℃保存运输

4.细胞爬片PFA固定15min后用无菌PBS洗涤后用无菌PBS浸泡,4℃冰袋保存运输到实验室。


注意事项:

1.BRDU,检测之前需动物活体注射化学试剂brdu,细胞需用化学试剂brdu处理造模,否则无阳性。