小鼠皮肤损伤模型服务的定义和实验方法的介绍：

一、 定义

小鼠皮肤损伤模型服务是指通过特定的物理、化学或手术方法，在健康小鼠皮肤上人为制造可控的创伤（如创口、溃疡、烧伤等），用于模拟人类皮肤损伤修复过程或特定皮肤病理状态（如慢性难愈创面、增生性瘢痕）的科学研究服务。该模型主要用于研究皮肤创伤愈合的分子机制、评估促进愈合或抑制瘢痕形成的药物/材料/疗法的有效性。

二、 实验方法

根据损伤类型和研究目的，常用的小鼠皮肤损伤模型建立方法包括：

1.  全层皮肤切除/切割伤模型 (Full-Thickness Excisional/Incisional Wound Model):

原理： 移除或切开皮肤全层（表皮、真皮，有时包括皮下组织），形成一个开放的创面，模拟手术切口或深度创伤。

操作：

选择成年小鼠（常用品系：C57BL/6, BALB/c，雌雄依研究需求而定）。

麻醉小鼠，剃除背部目标区域毛发，消毒皮肤。

切除伤 (Excisional):

使用皮肤活检打孔器（常用直径：6-10 mm）或手术剪/刀，在剃毛区精确切除一块圆形或方形的全层皮肤（包括表皮和真皮）。

创面通常暴露（研究自然愈合）或用特定敷料覆盖（研究敷料效果）。

切割伤 (Incisional):

使用手术刀片在皮肤上做一条直线切口（长度通常1-2 cm）。

切口深度穿透真皮全层。

伤口通常用缝合线（如尼龙线）或医用胶水闭合，模拟缝合手术切口。

对照组： 同品系同条件小鼠接受相同操作，或使用不同处理组进行对比。

2.  部分厚度皮肤损伤模型 (Partial-Thickness Wound Model):

原理： 移除表皮和部分真皮，保留部分真皮附件（如毛囊、汗腺）作为再生基础，模拟浅层擦伤、Ⅱ度烧伤或表皮剥脱。

操作：

准备同上（麻醉、剃毛、消毒）。

剃刀刮除法： 使用锋利的剃刀或手术刀片，在恒定压力下反复刮削目标皮肤区域，直至出现均匀的点状出血（表明真皮乳头层暴露）。需通过组织学验证深度。

热烙铁/烫伤法 (用于模拟烫伤)： 使用特定温度（如60-70℃）和接触时间（如5-30秒）的加热金属探头（或热水）接触皮肤，造成表皮和浅层真皮坏死脱落。需精确控制参数。

化学脱皮法 (较少用)： 涂抹高浓度化学剥脱剂（如三氯乙酸 TCA），破坏表皮和部分真皮。

3.  热烧伤模型 (Thermal Burn Model):

原理： 利用高温直接接触皮肤，导致蛋白质变性、细胞坏死，形成深度烧伤创面（通常模拟深Ⅱ度或Ⅲ度烧伤）。

操作：

准备同上。

接触法（常用且较精确）：

使用预热的金属棒（黄铜或不锈钢，常用直径：1-2 cm）或特定设计的烧伤仪。

将金属棒以预设的温度（如90-100℃）和压力，垂直接触剃毛皮肤预设时间（如5-15秒）。关键： 温度、压力、时间需严格控制且可重复。

热水法：

将剃毛的皮肤区域短暂浸入设定温度（如90-95℃）的热水中预设时间（如5-10秒）。

移除热源后，立即用室温生理盐水冷却创面，防止损伤加深。

创面通常暴露或覆盖非粘附敷料观察。

4.  缺血性皮瓣模型 (Ischemic Flap Model):

原理： 通过手术形成一块带蒂皮瓣，然后部分或完全阻断其血供，模拟临床上因血管问题导致的组织缺血、坏死和愈合障碍（如皮瓣移植失败、糖尿病足溃疡）。

操作：

准备同上。

背部随机皮瓣法（常用）：

设计一个基于背部中线或特定血管蒂的矩形皮瓣（如3 cm x 1.5 cm）。

沿设计线切开皮肤全层，将皮瓣从下方筋膜层掀起。

关键点： 保留一侧（蒂部）相连以提供部分血供，其余三边游离。

将掀起的皮瓣原位缝合回创面床。

通过手术（如结扎蒂部主要血管）或物理压迫（如硅胶片）可在皮瓣远端制造缺血区域。

观察皮瓣存活、坏死和愈合过程。

5.  慢性难愈创面模型 (Chronic Wound Model):

原理： 在基础创面（如全层切除伤）上叠加干扰愈合的因素（如糖尿病、缺血、细菌感染、反复损伤、药物抑制），延迟愈合进程，模拟糖尿病足溃疡、静脉溃疡、压疮等慢性创面。

操作：

糖尿病叠加创面法（最常用）：

使用链脲佐菌素（STZ）或遗传性糖尿病小鼠（如db/db, ob/ob）诱导高血糖状态。

在糖尿病小鼠稳定后（血糖>250 mg/dL），在其背部制作全层皮肤切除伤。

与非糖尿病小鼠的创面相比，愈合显著延迟。

感染叠加创面法：

在创面（如切除伤）上接种特定病原菌（如金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌），诱发持续感染和炎症，阻碍愈合。

缺血叠加创面法：

在缺血性皮瓣模型基础上制造创面，或在切除伤周围制造缺血带（如血管结扎）。

反复损伤法：

对正在愈合的创面（如切除伤）进行周期性、可控的再损伤（如轻微刮擦、化学刺激）。

（模型验证说明： 建模后需通过创面面积测量（愈合率）、大体观察（肉芽形成、上皮化、坏死、感染迹象）、组织病理学检查（H&E染色评估再上皮化程度、肉芽组织厚度、炎症细胞浸润、胶原沉积；Masson染色评估胶原；CD31免疫组化评估血管新生）等确认模型成功建立和愈合状态。此部分为验证环节，非实验方法本身）。