动物造模

小鼠皮下移植瘤(只成瘤)

皮诺飞生物小鼠皮下移植瘤(成瘤)模型服务的定义和实验方法的介绍:

一、 定义  

小鼠皮下移植瘤(成瘤)模型服务是指将人源或鼠源肿瘤细胞/组织植入免疫缺陷或免疫健全小鼠皮下部位,建立标准化肿瘤生长平台,专注于模型构建与成瘤稳定性验证,为后续药效实验提供可重复的肿瘤移植基础。该服务不包含给药干预环节,核心目标是确保高成瘤率及肿瘤生长一致性。

二、 实验方法  

1. 模型构建  

原理  

利用皮下疏松结缔组织的血管分布与空间延展性,支持肿瘤细胞定植、增殖形成均质化肿块。  

操作流程  

动物实验操作步骤表

步骤

标准化操作

动物准备

品系选择:

免疫缺陷鼠(BALB/c nudeNCG):人源细胞系(如A549HepG2

免疫健全鼠(C57BL/6):鼠源细胞系(如B16F104T1

周龄/性别:6-8周龄雌鼠(统一激素环境)

细胞/组织处理

细胞系:

胰酶消化后重悬于PBS,调整浓度至 15×10⁶/100μL

高难度细胞(如原代细胞)添加 30% Matrigel® 增强粘附

PDX组织:

患者肿瘤组织剪碎为1mm³碎片

套管针植入NSG小鼠皮下

接种操作

1. 麻醉小鼠(异氟烷吸入),酒精消毒背部皮肤

2. 22G针头穿刺右侧腋窝皮下

3. 注入细胞悬液或PDX组织碎片

4. 轻压针孔防渗漏

成瘤监控

监测时间:接种后第371014

测量方法:游标卡尺测量长径(L)、短径(W

体积计算:V=0.5 × L × W²

成瘤标准:体积≥100mm³且持续增长

2. 质量控制标准  

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肿瘤模型验收标准表

指标

验收标准

验证方法

成瘤率

≥95%(细胞系)、≥80%PDX组织)

接种14天后统计阳性成瘤个体

生长一致性

组内肿瘤体积差异≤20%CV值)

14天体积变异系数分析

组织病理确认

H&E染色明确恶性特征(核异型/核分裂象)

终点随机抽取3例样本验证

活体验证(可选)

荧光素酶标记细胞IVIS成像(光子值>1×10⁴ p/s/cm²/sr

接种后7天检测

三、 交付内容  

1. 成瘤报告:含个体肿瘤生长曲线、体积统计表(均值±SEM)  

2. 病理切片:H&E染色图像(标注核分裂像)  

3. 模型验证数据:  

成瘤率计算表  

体积变异系数(CV%)分析  

活体成像原始数据(如适用)  

> 注:  

>  伦理合规:操作符合AAALAC标准(协议号:IACUC2025SC03)  

>  周期:细胞系模型14天,PDX模型21天  

>  可定制选项:  

>    特定细胞系(提供30+验证库)  

>    荧光/生物发光标记  

>    不同接种部位(腹股沟、侧腹)