1.实验介绍
通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物。革兰氏阳性菌的细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,在脱色处理时,网孔会缩小,并且它不含类脂,在脱色处理时也不会出现缝隙,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色。革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂时,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的流出,因此脱色后呈无色,再经番红复染,革兰氏阴性菌呈红色。
2.实验流程
石蜡切片脱蜡至水,冰冻切片自然晾干→革兰氏染色→烤干→封片。
悬液:制备细胞涂片→晾干→固定→革兰氏染色→烤干→封片。
3.注意事项
(1)样品固定要求:样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上,固定时样品切勿冷冻结冰。
(2)运输要求:固定好的样品常温运输送样;石蜡切片常温运输,冰冻切片-20℃运输。
4.图片
革兰氏菌涂片: