1.实验介绍
β-半乳糖甘酶染色,衰老细胞通常体积变会大,表达pH6.0时有高酶活性的β-半乳糖苷酶。染色中以X-ga1(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)为底物,在衰老特异性的β-半乳糖苷酶催化下,半乳糖苷键被水解生成深蓝色产物,光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。
2.实验流程
细胞爬片或冰冻切片→β-半乳糖染液孵育过夜→核固红染核→酒精脱水→中性树胶封片
3.注意事项
(1)样品固定要求:样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上,固定时样品切勿冷冻结冰。
(2)运输要求:固定好的样品常温运输送样;
(3)冰冻切片-20℃运输,细胞爬片经专用固定液固定15min以上后封口,常温运输。
4.图片
细胞爬片(200*):
小鼠肾(200*)