1.实验介绍
三磷酸腺苷酶水解三磷酸腺苷和磷酸,并放出能量。磷酸和钠离子结合,在酶活性处形成无色的磷酸钙,磷酸钙经氯化钴处理形成磷酸钴,再经硫化铵处理形成棕黑色的硫化钴沉淀在酶活性部位。用碱作前孵育处理时,仅白肌纤维出现阳性反应,这对肌球蛋白ATP酶来说是特异性的
2.实验流程
冰冻切片:冰冻切片自然晾干→ATP孵育液染色→酒精脱水→封片。
3.注意事项
(1)样品固定要求:样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上,固定时样品切勿冷冻结冰。
(2)运输要求:固定好的样品常温运输送样,冰冻切片-20℃运输。
4.图片
大鼠肌肉(40*):