上机生化

谷胱甘肽过氧化物酶 GSH-PX

服务介绍:

谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)是机体内广泛存在的一种重要的催化过氧化氢分解的酶。它特异的催化还原型谷胱甘肽(GSH)对过氧化氢的还原反应,可以起到保护细胞膜结构和功能完整的作用。GSH-PX的活性中心是硒半胱氨酸,硒是GSH-PX的必需部分,每克分子酶含4克原子硒。测定GSH-PX的活力可以作为衡量机体硒水平的一项生化指标。

 



 


实验图:






实验结果展示:      

              


实验流程具体步骤以说明书为准):

1. 样品准备

血清、血浆、透明液体状样本、动植物组织,细胞等

2. 检测前准备

处理样本,配制试剂

3. 检测步骤

加样-加试剂-显色反应后酶标仪读数

4. 实验结果

样本OD值代入公式计算出结果,以EXCEL形式发出


送样运输要求:

1、动植物组织样本(干冰运输)

①动物处死后5min内取样,全程冰上操作,先取易降解的组织,如胰腺、肠、胃等,再取其它组织,组织块至少取50mg以上(黄豆大小)。组织取好后用预冷的PBS轻轻漂洗掉样本表面的血污,例如心、肝、脾、肾等血污较多的组织,可用预冷PBS清洗多次,直至血污清洗干净,用滤纸吸干组织表面液体,立即放入EP管或冻存管中-80℃保存。

②肠,胃,血管,食管,子宫等标本,取材后立即把组织切开用预冷PBS清洗多次,去除内容物,用滤纸吸干组织表面液体,立即放入EP管或冻存管中-80℃保存。

③刚孵化的斑马鱼离心后至少提供黄豆大小的数量。

④视网膜需单独剥离,小鼠至少需要4个视网膜合并,大鼠至少需要2个视网膜合并。

⑤皮肤样本需去净毛发。

2、血清样本(干冰运输)

全血标本加到促凝管(黄色管盖,QX0028)或者无菌无酶的EP管(EP-150X-J)中室温静置2小时后于2-8℃ 3000rpm/min离心15min,取上清放于-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。

3、血浆样本(干冰运输)

全血样本置于肝素抗凝管内(绿色管盖,QX0012),采血量为抗凝管标注体积的80%-100%,血量勿超过抗凝管标注体积否则抗凝效果不佳,血量不少于80%标注体积,否则样本会被抗凝剂稀释。轻轻颠倒混匀,30分钟内于2-8℃ 3000rpm/min离心15min,取上清放于-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。

4、细胞样本(细胞量至少107,细胞沉淀黄豆大小,干冰运输)

贴壁细胞:①培养好的细胞弃培养基,加入PBS,用细胞刮沿一个方向轻轻刮下细胞,切记不要反复刮,避免细胞刮破。②细胞液收集至离心管内,4℃低速离心(不超过3000rpm)5min,去上清,收集细胞沉淀,细胞沉淀要有黄豆大小。

悬浮细胞:①将细胞及培养基一起吸入离心管中,4℃低速离心(不超过3000rpm)5 min,去上清,收集细胞沉淀。②加入1mL PBS溶液重悬细胞,将细胞转移到1.5mL离心管中,4℃低速离心(不超过3000rpm)5min,去上清,收集细胞沉淀,细胞沉淀要有黄豆大小。

细胞上清:取细胞培养基于2-8℃,3000rpm/min离心15min取上清,于-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。

备注:不要寄送培养板或培养瓶,运输过程中细胞容易脱落且造成细胞活力下降,培养板有漏液风险,造成样本污染。

仅供科研用途,不可用于临床诊断!