手动生化

丙二醛 MDA

服务介绍:

机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基,后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸,引发脂质过氧化作用,并因此形成脂质过氧化物。如:醛基(丙二醛MDA)、酮基、羟基、羰基、氢过氧基或内过氧基,以及新的氧自由基等。脂质过氧化作用不仅把活性氧转化成活性化学剂,即非自由基性的脂类分解产物,而且通过链式或链式支链反应,放大活性氧的作用。因此,初始的一个活性氧能导致很多脂类分解产物的形成,这些分解产物中,一些是无害的,另一些则能引起细胞代谢及功能障碍,甚至死亡。氧自由基不但通过生物膜中多不饱和脂肪酸的过氧化引起细胞损伤,而且还能通过脂氢过氧化物的分解产物引起细胞损伤。因而测试MDA的量常常可反映机体内脂质过氧化的程度,间接地反映出细胞损伤的程度。MDA的测定常常与SOD的测定相互配合,SOD活力的高低间接反应了机体清除氧自由基的能力,而MDA的高低又间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重程度,通过SOD与MDA的结果分析有助于医学、生物学、药理及工农业生产的发展。

名称

规格

价格(元)

丙二醛MDA

反应

10

 


实验图:





实验结果展示:



                     


实验流程具体步骤以说明书为准):

1. 样品准备

血清、血浆、透明液体状样本、动植物组织,细胞等

2. 检测前准备

处理样本,配制试剂

3. 检测步骤

加样-加试剂-显色反应后酶标仪读数

4. 实验结果

样本OD值代入公式计算出结果,以EXCEL形式发出 


送样运输要求:

1、动植物组织样本(干冰运输)

①动物处死后5min内取样,全程冰上操作,先取易降解的组织,如胰腺、肠、胃等,再取其它组织,组织块至少取50mg以上(黄豆大小)。组织取好后用预冷的PBS轻轻漂洗掉样本表面的血污,例如心、肝、脾、肾等血污较多的组织,可用预冷PBS清洗多次,直至血污清洗干净,用滤纸吸干组织表面液体,立即放入EP管或冻存管中-80℃保存。

②肠,胃,血管,食管,子宫等标本,取材后立即把组织切开用预冷PBS清洗多次,去除内容物,用滤纸吸干组织表面液体,立即放入EP管或冻存管中-80℃保存。

③刚孵化的斑马鱼离心后至少提供黄豆大小的数量。

④视网膜需单独剥离,小鼠至少需要4个视网膜合并,大鼠至少需要2个视网膜合并。

⑤皮肤样本需去净毛发。

2、血清样本(干冰运输)

全血标本加到促凝管(黄色管盖)或者无菌无酶的EP管中室温静置2小时后于2-8℃ 3000rpm/min离心15min,取上清放于-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。

3、血浆样本(干冰运输)

全血样本置于肝素抗凝管内,采血量为抗凝管标注体积的80%-100%,血量勿超过抗凝管标注体积否则抗凝效果不佳,血量不少于80%标注体积,否则样本会被抗凝剂稀释。轻轻颠倒混匀,30分钟内于2-8℃ 3000rpm/min离心15min,取上清放于-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。

4、细胞样本(细胞量至少107,细胞沉淀黄豆大小,干冰运输)

贴壁细胞:①培养好的细胞弃培养基,加入PBS,用细胞刮沿一个方向轻轻刮下细胞,切记不要反复刮,避免细胞刮破。②细胞液收集至离心管内,4℃低速离心(不超过3000rpm)5min,去上清,收集细胞沉淀,细胞沉淀要有黄豆大小。

悬浮细胞:①将细胞及培养基一起吸入离心管中,4℃低速离心(不超过3000rpm)5 min,去上清,收集细胞沉淀。②加入1mL PBS溶液重悬细胞,将细胞转移到1.5mL离心管中,4℃低速离心(不超过3000rpm)5min,去上清,收集细胞沉淀,细胞沉淀要有黄豆大小。

细胞上清:取细胞培养基于2-8℃,3000rpm/min离心15min取上清,于-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。

备注:不要寄送培养板或培养瓶,运输过程中细胞容易脱落且造成细胞活力下降,培养板有漏液风险,造成样本污染。