在细胞生物学和免疫学研究中,细胞群体往往具有高度的异质性。传统检测方法只能提供群体平均水平,掩盖了单个细胞的重要信息。流式细胞术作为一种能够在单细胞水平进行多参数、高通量分析的技术,已成为现代生命科学研究不可或缺的工具。
然而,开展高质量的流式细胞术实验面临诸多挑战:
需要昂贵的多激光高端仪器和专业维护
荧光染料搭配与补偿调节技术门槛高
实验方案设计复杂,涉及样本制备、抗体选择、设门策略等专业知识
数据分析与解读需要丰富经验
皮诺飞生物流式细胞检测服务平台,配备了当前先进的分析型与分选型流式细胞仪,并由经验丰富的技术团队运营,为您提供从方案设计、实验执行到数据分析的全流程专业流式细胞术服务。
这是流式细胞术最经典和广泛的应用,尤其适用于免疫学研究。
免疫细胞分型:对血液、组织或培养细胞中的T细胞、B细胞、NK细胞、单核/巨噬细胞、树突状细胞等亚群进行精细分型。
淋巴细胞亚群分析:如CD4+/CD8+ T细胞、调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞亚群(Th1/Th2/Th17)、记忆T细胞、耗竭T细胞等。
干细胞与祖细胞鉴定:通过CD34、CD133等标志物鉴定造血干细胞、间充质干细胞等。
肿瘤细胞表面标志物检测:检测肿瘤相关抗原(TAA)或特定分子标志物的表达。
深入了解细胞在特定条件下的功能变化。
细胞周期检测服务:通过PI或DAPI染色,精确分析细胞群处于G0/G1期、S期、G2/M期的比例,评估增殖状态。
细胞凋亡检测:采用Annexin V/PI双染法、Caspase-3活性检测等,区分早期凋亡、晚期凋亡及坏死细胞。
细胞增殖追踪:使用CFSE或CellTrace™ Violet染料进行细胞分裂追踪。
细胞内因子检测:通过破膜固定技术,检测细胞因子(如IFN-γ, IL-2, TNF-α, IL-4, IL-17等)、趋化因子或磷酸化信号蛋白(p-STAT, p-AKT等)在细胞内的表达。
转录因子检测:如FoxP3(Treg)、T-bet(Th1)、GATA-3(Th2)、RORγt(Th17)等。
细胞信号通路激活状态检测:检测信号通路关键蛋白的磷酸化水平。
胞内因子分泌与表面标志物联合分析:在检测细胞因子分泌的同时,明确是哪一细胞亚群所分泌。
增殖与表型联合分析:追踪特定细胞亚群的分裂情况。
我们配备多台分析型流式细胞仪(如BD FACSymphony™ A5 SE等),拥有多达5激光、50+荧光检测通道的配置,能满足从基础到最复杂的多色细胞流式实验面板设计需求,最大程度减少荧光溢漏,确保数据精准。
我们的技术专家将根据您的研究目的,协助您:
设计多色抗体面板:合理搭配荧光染料,避免光谱重叠。
优化实验方案:包括样本处理、刺激条件、染色流程等。
设立严谨的对照:包括空白对照、单阳对照、同型对照、FMO对照等,确保数据解释的准确性。
血液样本:提供全血裂红或PBMC分离服务。
组织样本:提供实体组织解离成单细胞悬液服务。
细胞培养样本:标准化消化、洗涤与计数流程。
染色与固定:严格遵循标准化操作程序(SOP),保证染色效率和细胞活性。
我们不仅提供原始数据(FCS文件),更提供专业的分析报告:
设门分析:采用科学的、可重复的设门策略。
图形化结果:提供高质量的直方图、散点图、等高线图。
统计分析:提供细胞比例、平均荧光强度(MFI)、几何平均荧光强度(GeoMFI)等关键参数。
结果解读:结合生物学背景,对数据意义进行初步分析与说明。
前期咨询与方案设计:与您深入沟通实验目的,共同敲定检测指标、抗体面板及实验细节。
样本寄送指导与接收:提供详细的样本采集、保存与寄送指南,确保样本质量。
实验执行与质控:启动实验,进行样本处理、染色、上机检测,全程执行严格的质量控制。
数据获取与初步分析:仪器获取数据,技术员进行初步的设门与分析。
数据交付与报告解读:交付包含原始数据、分析结果图及简要解读的完整项目报告。周期通常为收到合格样本后5-7个工作日。
Q:流式细胞术和ELISA在检测细胞因子上有何区别?
A:流式细胞术检测的是细胞内因子,可以明确是哪个细胞亚群产生的,并分析同时产生多种因子的细胞,反映的是单个细胞的功能。ELISA检测的是培养上清中的分泌型因子,反映的是细胞群体的总体分泌水平。两者互为补充。
Q:你们最多可以做多少色的流式检测?
A:我们平台目前最多可支持30色以上的超高维流式细胞术检测。具体色数需要根据实验目标、可用荧光通道和抗体试剂进行个性化设计。
Q:进行细胞周期检测,对细胞数量有什么要求?
A:通常,进行一次细胞周期检测,至少需要1×10^6个状态良好的单细胞悬液。样本量过少会影响检测的准确性和峰图的质量。
Q:你们是否提供流式细胞分选服务?
A:是的。除了分析服务,我们也提供基于特定表型的细胞分选服务,可将目标细胞亚群高纯度地分选出来,用于下游的分子生物学实验、培养或测序等。
流式细胞术是解析复杂细胞群体、揭示细胞功能异质性的利器。选择专业的合作伙伴,能让这项强大技术为您的研究产出最可靠、最深入的数据。
无论您是需要基础的免疫分型、精准的细胞周期与凋亡检测,还是复杂的高维胞内因子分析,皮诺飞生物流式平台都将是您值得信赖的选择。
立即联系我们的流式技术专家,获取针对您研究课题的检测方案设计与报价。