饱和油红O染液产品说明书.pdf

产品简介

油红O又名苏丹红5B，是一种脂溶性偶氮染料。该染料能特异性使细胞或组织内的甘油三脂等中性脂质着色，对于磷脂和类固醇等染色较弱，基本原理是油红O溶于脂质中使脂质呈现红色至橘红色。

本产品饱和油红O染液，是油红O的饱和溶液，使用前经纯水稀释后，可用于冰冻切片组织或细胞爬片的染色，经工作液染色后的组织内的脂滴呈深红色至橘红色不等。

储存与运输

常温避光保存与运输，有效期12个月。

使用方法

1. 配制工作液：临用前取6份饱和油红O染液与4份蒸馏水充分混合均匀，室温静置8-16h，用抽滤仪过滤一次，即为油红工作液。工作液需及时使用，不可放置过夜，否则会影响染液效价。

2. 需自备试剂：60%异丙醇(用于分化油红o)。

3. 样本准备

细胞爬片：吸弃细胞培养液，沿孔板边缘缓慢加入PBS。加入2-3ml的4%多聚甲醛固定液，室温固定10-15 min，PBS漂洗2次。

 冰冻切片：切片从-20℃取出后室温静置10-15 min恢复至常温。

染色步骤

对于细胞爬片

（1）孔板内加入少量60%异丙醇覆盖细胞15-20 s，吸弃60%异丙醇，稍微晾干水分。

（2）向孔板内加入油红O工作液2-3ml（对于细胞爬片，配制好工作液最好2h内使用，时间放置越久，颜色易变淡）覆盖细胞，室温避光染色15-30 min，吸弃染色液。

（3）立即加入60%异丙醇快速分化3-5 s，纯水洗3次，每次5 min。

（4）（可选）加入苏木素染液对细胞核进行染色10-15s，水洗，返蓝后再水洗2次。

（5）取出爬片，有细胞的一面朝下，滴加甘油明胶封片剂进行封片。

 对于冰冻切片

(1) 恢复至室温的冰冻切片轻轻浸入油红O工作液浸染8-10 min（加盖避光）。

(2) 取出切片，稍沥干3 s后依次浸入两缸60%异丙醇分化，每缸5-10 s。

(3) 切片依次浸入两缸纯水中浸洗，每次10 s。

(4) （可选）切片浸入苏木素染液对细胞核进行染色，水洗，返蓝再水洗，稍微晾干水分后滴加甘油明胶封片剂封片。

注意事项

1. 样品为新鲜组织冰冻切片，切好后的切片需先进行固定，后再染色，固定样品与新鲜样品形态有所差异。

2. 油脂密度小，易产生移位，操作过程动作尽量轻柔，可稍微缓解脂肪的丢失或者移位。

3. 封片后油红O样本不能长期保存，应尽快进行多层扫描或者拍照留存图片，否则易析出结晶。

4. 甘油明胶封片剂封片时需注意，尽量避免产生气泡。

5. 本产品100ml染液大约可用于80张切片的染色。当组织或细胞着色明显偏浅或颜色异常时请更换新的染液。

6. 为了您的安全和健康，操作时请穿实验服并佩戴一次性手套。

本产品仅供科研使用，不用于临床诊断！

（ 产品包装升级中，请以实物为准）