**一、技术原理与科研价值**  

流式细胞术是大鼠免疫微环境解析的金标准，皮诺飞生物通过500+例实验证实，其可同时检测15+免疫细胞亚群，分辨率达0.2μm颗粒。相较于传统ELISA，具有单细胞水平、多参数分析的核心优势，特别适用于：  

- 自身免疫疾病模型（如类风湿关节炎大鼠）  

- 肿瘤免疫治疗药效评估（PD-1/CTLA-4抑制剂）  

- 移植免疫排斥反应监测  

**二、皮诺飞特色检测系统**  

1. **硬件配置方案**  

   - BD FACSymphony™ A5（标配5激光40检测器）  

   - 自动化上样系统（通量达384孔板）  

   - 专用大鼠抗体库（覆盖200+标记物）  

2. **标准化样本制备流程**  

**三、核心检测指标与抗体选择**  

| 细胞亚群 | 关键标记物组合 | 推荐荧光染料 |  

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| T细胞 | CD3+CD4+CD8+ | FITC/PE-Cy7/APC |  

| B细胞 | CD45R+CD19+ | PerCP-Cy5.5 |  

| NK细胞 | CD161a+CD3- | PE-Vio770 |  

| 单核巨噬细胞 | CD11b/c+CD68+ | APC-Vio780 |  

| 干细胞 | CD34+CD133+ | BV421 |  

**四、创新多色panel设计服务**  

1. **8色基础方案**（适用于表型筛查）  

   CD3/CD4/CD8/CD25/CD45RA/CD11b/CD161a/DAPI  

2. **15色深度解析方案**（含功能标记物）  

**五、关键质控环节**  

1. **样本活性保障**  

   - 离体后4h内完成处理（推荐皮诺飞专用保存液）  

   - 活细胞率＞95%（7-AAD验证）  

2. **补偿校准策略**  

   - 单阳对照样本必做  

   - 每日运行CS&T质控 beads  

3. **数据标准化分析**  

     

   （展示淋巴细胞/单核细胞/粒细胞分群逻辑）  

**六、皮诺飞特色数据服务**  

1. **AI辅助分析平台**  

   - 自动识别异常细胞群（训练集含10万+大鼠数据）  

   - 一键生成符合GLP规范的报告  

2. **跨平台关联分析**  

   - 流式数据与转录组测序结果整合  

   - 免疫细胞占比与病理评分相关性建模  

3. **典型应用案例**  

   - 案例1：糖尿病大鼠脾脏Treg细胞占比下降（p＜0.01）  

   - 案例2：黑色素瘤模型PD-L1+细胞升高2.3倍  

**七、技术问答与排错指南**  

Q：为何CD4+细胞群出现双峰？  

A：通常因非特异性结合导致（建议增加Fc阻断剂孵育步骤）  

Q：如何提高稀有细胞检出率？  

A：推荐使用皮诺飞高灵敏检测方案（最低可测0.01%频率）  

**八、延伸技术服务**  

- 胞内因子检测（IFN-γ/IL-17等）  

- 磷酸化流式（pSTAT3/pAKT信号通路）  

- 外泌体表面标记物检测