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动物模型实验分享:雄激素性脱发(AGA)小鼠造模全流程及病理验证

雄激素性脱发模型

雄激素性脱发(Androgenetic Alopecia, AGA),也称为脂溢性脱发Seborrheic alopecia, SA,是一种受遗传因素和雄激素影响的脱发类型,AGA占总脱发人数的 84.8%,影响全世界 60-70%的人口AGA可能受到多种遗传因素的影响,包括与雄激素代谢、毛囊生长周期调控相关的基因变异,雄激素在头皮的特定区域(如额叶和顶点区域)与毛囊中的雄激素受体结合,导致毛囊逐渐萎缩和退化。AGA影响男性和女性,但在男性中更为普遍和显著在我国男性的患病率约为 21.3%女性患病率约为 6.0%。本病发病率逐年增加,且呈现年轻化的趋势,具有一定的损容性,对人们的生活、工作、心理都造成较大的负面影响。因此 AGA 的治疗和预防越来越成为医学上研究的热点[1]

AGA模型是研究雄激素性脱发的重要工具,通过构建AGA模型可以深入了解雄激素诱导的脱发病理机制并开发新的治疗方法。本模型通过给小鼠丙酸睾酮雄激素类药建立AGA模型

1 C57BL/6J小鼠毛发生长周期

1.1 背景

毛发生长具有周期性,生长周期为17-19天,分为生长期、退行期和休止期3个阶段。生长期的毛囊具有高度代谢活性,形成有色素的高度分化的毛干,位于毛母质中的黑素细胞仅在生长期产生黑色素,从而使生长期的皮肤和毛发的颜色为黑色,退行期皮肤会变为灰色,休止期这些活动则停止,皮肤变为粉红色[2]

1.2 毛发生长周期相关实验结果

对处于毛发休止期的6-8周龄雄性C57BL/6J小鼠进行拔毛处理,拔毛后5-6 d局部皮肤重新进入生长期,颜色变黑,第9-11 d局部可见新毛长出,第17-19 d进入退行期,皮肤颜色变成灰色,第20 d左右进入休止期皮肤变回粉色[3]

1.3 总结

小鼠毛发生长周期约为:生长期(14 d);退行期(2-3 d);休止期(退行期结束后直到被人工脱毛或拔毛等创伤刺激后进入生长期位置,或退行期结束后直到死亡)。

2 雄激素性脱发模型建立材料与方法

2.1 材料

2.1.1实验动物

9只6-8周龄性成熟C57BL/6J雄性小鼠,体重20-22 g,饲养环境温度22-25℃,湿度55%-60%,12 h光照和12 h黑暗交替,实验前适应性饲养1周。

2.1.2试剂与仪器

丙酸睾酮(麦克林,T818615),实验用玉米油(麦克林,C805618);动物专用剃毛器、呼吸麻醉机、异氟烷、注射用生理盐水1 mL注射器、50 mL离心管、10 mL离心管、常规手术器械(剪刀、镊子)等。

2.1.3药物配制

称取1 g丙酸睾酮粉末先以40 mL无水乙醇溶解至浓度为25 mg/mL,后取4 mL稀释后的丙酸睾酮加入36 mL实验用玉米油充分混匀,使最终药物浓度为2.5 mg/mL。

2.2 模型建立

2.1 实验分组

C57BL/6J小鼠,雄性,6-8周龄,18-22 g,适应性饲养7 d,随机分为3组,每组各3只。

①空白对照组;②丙酸睾酮模型组;③丙酸睾酮+米诺地尔组。

2.2 建模方法

造模开始前,使用电动理发器及脱毛膏去除小鼠后背约5 cm*3 cm的毛发,建立脱毛膏法脱毛小鼠模型。

空白对照组:小鼠皮下注射生理盐水,注射30 min后背部皮肤涂抹0.3 mL超纯水;

丙酸睾酮模型组:小鼠皮下注射25 mg/kg丙酸睾酮,注射30 min后背部皮肤涂抹0.3 mL超纯水;

丙酸睾酮+米诺地尔组:小鼠皮下注射25 mg/kg丙酸睾酮,注射30 min后背部皮肤涂抹0.3 mL 2% 米诺地尔,各组处理均连续处理28天。

造模期间,第1、7、14、17、21、28 d对小鼠脱毛区域拍照,观察皮肤外观变化,计算新生毛发覆盖率。

造模结束后,可选择用无菌组织剪取背部脱毛区域皮肤约1 cm*1 cm,制作皮肤病理切片,HE染色观察皮肤毛囊形态、数量,用于评价模型是否成功。造模成功标准:①小鼠背部毛发生长稀疏,毛发颜色暗淡,背部皮肤可见皮脂溢出。②组织病理学上表现为:毛囊数量减少,毛干色素变浅、直径变小,毛囊微型化。

2.3实验结果

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1 小鼠背部皮肤颜色变化和毛发生长情况


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2 造模28d后对照组、丙酸睾酮组和丙酸睾酮+米诺地尔组小鼠背部皮肤H&E染色


成功构建出丙酸睾酮诱导的雄激素性脱发小鼠模型,模型组小鼠均观察到明显的脱发症状,且在使用2%米诺地尔后脱发情况得到了一定程度的改善。
参考文献

[1]许敏,李慧.复方斯亚旦生发酊联合非那雄胺片治疗雄激素性脱发疗效观察[J].新疆医学,2025,55(08):964-968.DOI:CNKI:SUN:XJYI.0.2025-08-010.

[2]Cesarini JP. Melanin and melan ogenesis of the hair . ln: Cam acho F, eds. Trichology. Spain: Aula medica group, 1997. 65-74.

[3]杨淑霞,马圣清,钟志红,等.C57BL6小鼠毛发周期动物模型的建立[J].中华皮肤科杂志,1999,(04):34-35.DOI:CNKI:SUN:ZHPF.0.1999-04-014.