实验介绍：

透射电子显微镜（transmission electron microscope，TSE）是利用透射电子成像，因而要求样品极薄厚度不能超100nm。其结构包括三大部分：电子学系统、真空系统和电子光学系统；扫描电子显微镜 (scanning electron microscopy，SEM) 是利用聚焦的非常细的高能电子束在试样上扫描，激发出各种物理信息。通过对这些信息的接受、放大和显示成像，获得测试样表面形貌的观察。其结构由真空系统，电子束系统以及成像系统组成。  

实验流程：

透射电镜： 树脂包埋—制片—拍照 

扫描电镜：脱水-干燥-喷金-拍照

实验结果展示：

透射电镜： 

线粒体                                             胆固醇结晶                                     肥大细胞

扫描电镜：

 纳米材料                                         真菌孢子链                                     细胞

皮诺飞电镜送样单

下附电镜样本准备方法及要求，如因前期样本准备出现问题或未详细填写送样单中样品

下附电镜样本准备方法及要求，如因前期样本准备出现问题或未详细填写送样单中样品

内容及要求，或者实验本身存在定位或易降解等方面异常难度，导致结果图片与预期结果不符的，我司一概不接受退单。

透射电镜样本准备方法及要求

以下所有样本必须尽量新鲜，固定液或悬浮液都不得冷冻结冰！

1、动物组织样本

①1-3min内取样，取样组织米粒大小，尽量薄。（尽量保持在1-3mm³，电镜所用固定剂穿透力较弱，为了与固定液的穿透速率相适应，样品块的大小不得超过此范围，以确保固定效果）。

②由于电镜观察范围有限，要求取材时尽量精确到需要观察的目的部位，然后在同一个部位取3～5块样品（如观察肾小球取肾皮质；观察胰岛取胰岛丰富的胰尾；皮肤，肠胃等在固定液中易打卷的组织可将组织粘在滤纸上进行固定）。

③取材时一定注意避免镊子挤压等机械损伤，刀片要锋利避免挫伤组织。

④ 组织取下后立即投入电镜固定液内室温固定2h，再转移至4℃保存，4℃冰袋运输，在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。

2、植物组织样本

①取材要求同动物组织样本。

②组织投入固定液后需要进行真空抽气让组织沉底，如无条件抽气可用滤纸将组织塞进固定液内，组织不能漂浮在固定液表面。

3、细胞样本

贴壁细胞：（对细胞外形没有要求且实验目的与细胞膜无关）

培养好的细胞弃培养基，加入胰酶消化。 胰酶消化好后（时间不宜过长），加培养基终止消化，吸管轻轻吹打至细胞起浮。吸入离心管，低速离心（不超过3000转），2min左右，细胞团要有绿豆大小；弃上清，加入电镜固定液（固定液需提前恢复至室温），细胞团吹散重悬，室温避光固定30min，再转移至4℃保存，4℃冰袋运输，在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。

（对细胞外形有要求且实验目的与细胞膜有关）

培养好的细胞弃培养基，加入电镜固定液（固定液需提前恢复至室温），常温避光固定5min左右，用细胞刮（或软橡胶盖切得平整小方块）沿一个方向轻轻刮下细胞，切记不要反复刮，避免细胞刮破，然后用巴氏吸管把细胞液吸入离心管内，放入离心机（不超过3000转），低速离心2min左右，细胞团要有绿豆大小，弃固定液后加新的电镜固定液，细胞团吹散重悬；室温避光固定30min，再转移至4℃保存，4℃冰袋运输，在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。

悬浮细胞：离心收集细胞要肉眼可见细胞沉淀芝麻至绿豆大小，弃培养基后加电镜固定液室温避光固定2h，再转移至4℃保存，4℃冰袋运输，在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。

4、细菌样本

长于固体培养基的细菌：连带着培养基一起挑下细菌放于电镜固定液内室温固定2h，再转移至4℃保存， 4℃冰袋运输，在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。

悬浮细菌孢子等：离心收集细菌要肉眼可见细菌沉淀芝麻至绿豆大小，弃培养基后加电镜固定液室温固定2h，再转移至4℃保存，4℃冰袋运输，在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。

5、病毒

破碎组织细胞，粗离心去除细胞碎片取上清，超速离心分离出病毒（病毒提取的过程需要客户自己完成）。用缓冲液（如PBS）悬浮病毒，4℃保存运输，尽快滴片做负染后及时电镜观察拍照。

6、外泌体囊泡等

客户自己完成外泌体囊泡等的提取收集，用缓冲液（如PBS）悬浮，4℃保存运输，尽快制片做负染后及时电镜观察拍照。（因此类样品极易降解，样品越新鲜越好，数小时内完成滴片负染，否则做出的效果很不理想甚至完全观察不到）

7、纳米材料等无机材料

直接准备粉剂或用缓冲液（如PBS）悬浮，常温保存运输即可。做负染后电镜观察拍照。