实验介绍:
原位杂交技术(in situhybridization)是以标记的核酸分子为探针,在组织细胞原位检测特异核酸分子的技术。 使含有特异序列、经过标记的核酸单链即探针,在适宜条件下与组织细胞中的互补核酸单链即靶核酸发生杂交,再以放射自显影或免疫细胞化学方法对标记探针进行探测,从而在细胞原位显示特异的DNA或RNA分子
实验流程:
DAB: 组织切片脱蜡至水—画圈消化—预杂交—杂交过夜— 滴加鼠抗地高辛标记过氧化物酶(anti-DIG-HRP)—DAB显色— 苏木素染核—脱水透明—封片镜检
荧光:组织切片脱蜡至水—画圈消化—预杂交—杂交过夜— 滴加鼠抗地高辛标记过氧化物酶(anti-DIG-HRP)—TSA荧光素— Dapi染核—封片镜检
注意事项:
(1)石蜡切片:组织取样后应立即置于固定液中,常温运输切勿冷冻结冰;
(2)冰冻切片:-20度运输
实验结果展示:
Fish CD68+探针 CK19+探针